GE 試劑 細(xì)胞分離液Percoll 17-0891-09

原理

ELISA是以免疫學(xué)反應(yīng)為基礎(chǔ)，將抗原、牽9體的特異性反應(yīng)與酶對(duì)底物的高效催化作用相結(jié)合起來(lái)的一種敏感性很高的試驗(yàn)技術(shù)。由于抗原、抗體的反應(yīng)在一種固相載體──聚苯乙烯微量滴定板的孔中進(jìn)行，每加入一種試劑孵育后，可通過(guò)洗滌除去多余的游離反應(yīng)物，從而保證試驗(yàn)結(jié)果的特異性與穩(wěn)定性。在實(shí)際應(yīng)用中，通過(guò)不同的設(shè)計(jì)，具體的方法步驟可有多種。即:用于檢測(cè)抗體的間接法(圖a)、用于檢測(cè)抗原的雙抗體夾心法(圖b)以及用于檢測(cè)小分子抗原或半抗原的抗原競(jìng)爭(zhēng)法等等。比較常用的是ELISA雙抗體夾心法及ELISA間接法。

ELISA中常見(jiàn)問(wèn)題及解決方法

ELISA試驗(yàn)以靈敏度較高、特異性較好的特點(diǎn)在臨床上得到了廣泛的應(yīng)用，但操作中的各個(gè)環(huán)節(jié)對(duì)試驗(yàn)的檢測(cè)效果影響較大，如不注意，有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。我將操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問(wèn)題的原因及解決辦法總結(jié)于下，以期給同行帶來(lái)一些啟發(fā)，提高試驗(yàn)質(zhì)量。

美國(guó)GE細(xì)胞分離液Percoll17-0891-09

•  在溫和的條件下，分離細(xì)胞、亞細(xì)胞結(jié)構(gòu)和較大的病毒分子（可小至~70S），保持其存活和形態(tài)的完整性

 •  對(duì)細(xì)胞無(wú)毒性

 •  可調(diào)整到生理狀態(tài)下的離子強(qiáng)度和pH

 •  使用角轉(zhuǎn)頭，以中速離心，即可形成梯度

 •  等滲梯度，密度zui大可達(dá)到1.3 g/ml。

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Percoll為低粘度的密度梯度介質(zhì)，用于分離細(xì)胞、亞細(xì)胞結(jié)構(gòu)和較大的病毒分子。粘度低，因此使用低的離心力（200-1000× g），只需幾分鐘就可形成梯度對(duì)細(xì)胞進(jìn)行分離。Percoll供貨時(shí)已經(jīng)消毒，并且易于再次消毒。包裝于易打開(kāi)，并可再次密封的250ml和1升瓶中。

* 注意：僅限于體外研究

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